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產(chǎn)品名稱:DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料

產(chǎn)品型號(hào):G7140

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料
貨號(hào) :G7140
規(guī)格:0.5ml (10000×)
保存:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。
注意 :本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測試劑,使用時(shí)請按照說明書操作。

免費(fèi)咨詢:010-50973130

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G7140DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料的詳細(xì)資料:

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料

貨號(hào) :G7140

規(guī)格:0.5ml (10000×)

保存:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。

注意 :本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測試劑,使用時(shí)請按照說明書操作。

 

產(chǎn)品簡介 :

目前常見的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I (屬于花氰類染料) 雖然毒性比 EB 低、 靈敏度比 EB 高,但由于其化學(xué)穩(wěn)定性差;此外,SYBR Green I 在電泳過程中能在 DNA 分子間移位,很容易使 DNA 條帶模糊和扭曲,電泳清晰度和分辨率下降。所以在實(shí)際應(yīng)用中依然不能有效替代 EB。本產(chǎn)品是同時(shí)具有 EB 穩(wěn)定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料,其特點(diǎn)如下:

1.  低毒。其主要成分未發(fā)現(xiàn)對人體有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保護(hù)使用者的健康和保護(hù)日益惡化的環(huán)境。

2.  靈敏。檢測靈敏度跟 EB 相當(dāng),能滿足常規(guī)核酸電泳實(shí)驗(yàn)要求。

3.  穩(wěn)定。對光、水和熱的穩(wěn)定性跟 EB 相當(dāng),可加入瓊脂糖凝膠中反復(fù)熔化。

4.  無分子間位移現(xiàn)象。不會(huì)出現(xiàn) SYBR 染料常見的條帶模糊和扭曲現(xiàn)象。

5.  使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中,也可以電泳后染色,還可用于 PAGE。

6.  跟各種常用的核酸電泳緩沖液(如 SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。

7.  觀察時(shí)不需要任何額外的儀器設(shè)備或 UV 光源,可以使用現(xiàn)成的觀察 EB 的 300nm UV。

8.  可用于 RNA 染色(也呈綠色)。

9.  DNA 或 RNA 濃度較高時(shí)還可以直接在日光下觀察 (需要將膠放在黑色背景下) 。 由于避免了 UV 對 DNA的傷害,尤其適用于膠回收實(shí)驗(yàn)。

 

使用方法:

電泳中染色:

本方法是將 DNAGREEN 直接加入溶化的凝膠中使用,只適用于瓊脂糖凝膠電泳,不適用于 PAGE。

1.  將 DNAGREEN 直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中, 每 100mL 凝膠加 310 uL DNAGREEN, 混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料(如 EB 和 SYBR Green I,否則會(huì)相互干擾) 。在 100mL 瓊脂糖凝膠中加入 DNAGREEN 的量不要超過 10 uL,否則背景增強(qiáng)。注意:一定要保證瓊脂糖*熔化,尤其是在*次熔化膠的時(shí)候,否則未熔化的小顆粒將產(chǎn)生跟染料相同的熒光。

2.  將 DNA 樣品與 DNA 上樣液按比例混合后上樣。注意:一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液,否則SDS 會(huì)跟染料結(jié)合,極大地降低靈敏度。

3.  上樣后電泳,電泳參數(shù)同常規(guī)的電泳。

4.  電泳結(jié)束后在 300 nm 左右 的 UV 下觀察。

注意:不要使用波長為 260 nm 或 360 nm 的 UV,否則檢測靈敏度會(huì)降低。如果 DNA 或 RNA 濃度較高,還可以直接在日光下直接觀察(需要將膠放在黑色背景下) ,

避免 UV 對 DNA 的傷害,尤其適用于膠回收實(shí)驗(yàn)。

5.  用配置了 520-550 nm 濾光片(一般呈黃色或深黃色)的相機(jī)拍照。注意:不要使用與 EB 兼容的紅色濾光片(它能阻擋 520-550 nm 的光) 。如果能再加上能濾去 UV 的濾光片,效果會(huì)更好。

6.  后續(xù) Southern、轉(zhuǎn)膜或 DNA 膠回收實(shí)驗(yàn)按常規(guī)操作進(jìn)行。

 

電泳后染色:

本方法是在電泳后對 DNA 進(jìn)行染色,適用于瓊脂糖凝膠電泳和 PAGE。但該方法需要單獨(dú)的染色處理,染料用量較大,不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色。

1.  按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2.  用去離子水將 DNAGREEN 稀釋 500 倍后(100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN) ,將凝膠放入,室溫下?lián)u晃染色 30 分鐘(對瓊脂糖凝膠)或 15 分鐘(對 PAGE) 。

3.  用水脫色 10-30 分鐘,具體時(shí)間需根據(jù)背景強(qiáng)弱決定。

注意:電泳后染色液可以反復(fù)使用次數(shù)。

 

疑難解答: 

Q:本產(chǎn)品可否用于 RNA 染色?

A: 可以,不論 RNA 是在甲醛變性膠中電泳,還是在普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 膠中電泳,RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一樣呈綠色,

Q:本產(chǎn)品是否可以加入上樣液中進(jìn)行染色?

A:不行,本產(chǎn)品只能直接加入凝膠中進(jìn)行染色或電泳后再染色。

Q:為何前端(靠近正極)的 DNA 條帶很淡或根本看不見?

A:跟 EB 一樣,電泳時(shí) DNAGREEN 朝負(fù)極方向移動(dòng),當(dāng)前端的 DNA(小片段)進(jìn)入沒有 DNAGREEN的區(qū)域時(shí),已經(jīng)結(jié)合的染料分子會(huì)逐漸從 DNA 分子上脫落,所以條帶會(huì)變淡或根本看不見。解決辦法之一是縮短電泳時(shí)間或電泳后再染色;之二是在每 100 mL 電泳緩沖液中補(bǔ)加 3-5uL 染料。

Q:本產(chǎn)品在哪種緩沖液中效果好?

A:DNAGREEN 染料在不同緩沖液中背景熒光強(qiáng)度不同,從弱到強(qiáng)的順序是:SuperBuffer-2、TBE、TAE。

在背景較強(qiáng)的緩沖液體中,可以適當(dāng)降低染料的用量,比如 100mL 膠中加 3-5 uL。濃度需要稍做摸索。

Q:用 SYBR 染色的 DNA 在電泳時(shí)為何容易發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象?

A:SYBR 染料一般與 DNA 的小溝結(jié)合,但在常規(guī)電泳條件下該結(jié)合并不牢固,染料分子可以在標(biāo)記的和未

標(biāo)記的 DNA 分子之間轉(zhuǎn)移,使 DNA 分子的泳動(dòng)速度時(shí)快(無染料結(jié)合時(shí))時(shí)慢(有染料結(jié)合時(shí)) ,發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象。嵌入型染料(如 EB 和本產(chǎn)品)與 DNA 結(jié)合牢固,則無此現(xiàn)象。

 

相關(guān)產(chǎn)品 :

T1050 5×TBE  緩沖液

T1060 50×TAE  緩沖液

E1020 EB 溶液 (10mg/ml)

A1020 40% 丙烯酰胺( 19:1 )

D1010 6×DNA Lodding Buffer

M1060  D2000 DNA Ladder

PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料)

 

DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


DNA電泳試劑 DNAGREEN  核酸染料運(yùn)輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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