產(chǎn)品名稱:改良油紅O染色液 G1261
產(chǎn)品型號:G1261
產(chǎn)品特點:改良油紅O染色液 G1261中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑 B、油紅 O 法等。傳統(tǒng)方法中,常采用蘇丹染料,近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅 O 更適合脂肪的染色。
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改良油紅O染色液 G1261
貨號:G1261
有效期:6 個月有效。
產(chǎn)品說明:
產(chǎn)品名稱 2×50ml 2×100ml Storage
試 劑 (A) : 改
良 Oil red O stain
A1: Oil red O stain A 30ml 60ml 4℃ 避光
A2: Oil red O stain B 20ml 40ml RT
臨用前,按 A1:A2=3:2 比例混合,靜置 10min, 即獲得改良 Oil red O Stain,不
宜提前配制。
試劑(B): Mayer 蘇木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光
產(chǎn)品說明:
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機溶劑(例如乙醇、乙mi等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一,在氧化時釋放出能量。
中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑 B、油紅 O 法等。傳統(tǒng)方法中,常采用蘇丹染料,近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅 O 更適合脂肪的染色。油紅 O 是很強的脂溶劑和染脂劑,較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀),與磷脂結(jié)合力稍差。其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較在原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時染料就從有機溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。
改良油紅 O 染色液主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,常發(fā)生于肝、腎、心等實質(zhì)臟器的脂肪變性,細胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。標本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用 10%的福爾馬林)、也不采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片。脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃紅色,但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。
自備材料:
1. 60%的異丙醇
2. 蒸餾水
3. 1%的鹽酸溶液
4. 稀碳酸鋰溶液
5. 甘油明膠或阿拉伯糖膠
操作步驟(僅供參考):
1、 冰凍切片厚度 6~10µm,不固定或 10%福爾馬林固定 10min 后水洗。
2、 切片入蒸餾水中稍沖洗。
3、 切片入 60%的異丙醇內(nèi)浸洗 20~30s。
4、 切片入改良油紅 O 染色液中(加蓋),密閉染色 10~15min。
5、 分色:入 60%的異丙醇內(nèi)稍洗以便去除染液。
6、 入蒸餾水中稍微清洗。
7、 Mayer 蘇木素染色液復染核 1~2min。
8、 (可選)1%的鹽酸溶液稍微分化一下。
9、 (可選)自來水漂洗 10min 或稀碳酸鋰溶液中促藍。
10、 入蒸餾水中稍微清洗。
11、 用濾紙吸干周圍水分。
12、 甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
染色結(jié)果:
中性脂肪 橙紅色或橘紅色
細胞核 藍色
注意事項:
1、 改良油紅 O 染色液不夠穩(wěn)定,易產(chǎn)生沉淀,不宜提前配制。
2、 如果 60%的異丙醇不易獲得,亦可采用 70%的乙醇。
3、 由于脂肪易溶于有機溶劑,所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過冰凍切片染色來顯示。
4、 作脂肪染色的冰凍切片不可太薄,過薄的切片常會使脂質(zhì)丟失。
5、 Mayer 蘇木素染色液復染時間不能過長。
6、 染色結(jié)果不能長期保存,應盡快觀察及照相。
7、 甘油明膠封固的樣本,保存時間不長。如需長期保存,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊緣用中性樹膠封閉。
8、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
相關文獻:
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