產(chǎn)品名稱(chēng):通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV)
產(chǎn)品型號(hào):RP1105
產(chǎn)品特點(diǎn):RP1105 通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV)貨號(hào):RP1105規(guī)格:50T/100T保存:-20℃保存,避免反復(fù)凍融,復(fù)檢期為 1年。
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通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV)
貨號(hào):RP1105
規(guī)格:50T/100T
保存:-20℃保存,避免反復(fù)凍融,復(fù)檢期為 1年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒適用于各種 RNA 制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的PCR 擴(kuò)增。它采用M-MLV 進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),能夠獲得較長(zhǎng)的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時(shí),在20ul 反轉(zhuǎn)錄體系和50ul PCR 反應(yīng)體系中,還可以一次性得到足夠量的PCR 產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實(shí)驗(yàn)。
本試劑盒中配置的酶均為進(jìn)口的酶。RT 酶采用進(jìn)口的M-MLV,所以cDNA 更長(zhǎng),基因的信息保留得更完整!反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中特異的RNase 抑制劑可有效降低由于外源RNase 污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的風(fēng)險(xiǎn)。本試劑盒使用方便、快捷,可廣泛用于cDNA 克隆及目的基因檢測(cè)等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
操作步驟:
一、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
1、在冰浴的無(wú)RNase 的離心管中加入如下反應(yīng)成分:
1-5ug 總RNA 或50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT)16 或2 pmole 基因特異性引物
補(bǔ)RNase-free ddH2O 14.5ul
2、70℃保溫5min 后迅速在冰上冷卻2min,簡(jiǎn)短離心收集反應(yīng)液后加入以下各組分:
4ul 5×M-MLV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul RNasin
1ul M-MLV
3、42℃溫浴60min,如果是用隨機(jī)引物,請(qǐng)先將離心管置25℃溫浴10min,再42℃溫浴60min。
注意事項(xiàng):
1、 用于cDNA 合成反應(yīng)的相關(guān)試劑和耗材盡可能用DEPC 進(jìn)行處理,并在高壓滅菌后使用。有些試劑不
能高壓滅菌時(shí),先用經(jīng)過(guò)滅菌的器具、水等配制溶液后,再將溶液進(jìn)行過(guò)濾除菌處理。
2、 試劑盒的各組分應(yīng)在-20℃保存,避免反復(fù)凍融,有效期12 個(gè)月。
3、 RNA 樣品要避免反復(fù)多次凍融,應(yīng)使RNA 在冰浴中處于融化狀態(tài)。
相關(guān)產(chǎn)品:
R1600 DEPC 處理水
SR0060 液相RNase 清除劑
R1200 總RNA 提取試劑盒
SR0080 RNAsaver RNA 長(zhǎng)效保存液
R1050 5×RNA Loading Buffer
RP1200 通用RT-PCR 試劑盒(AMV)含Mg
PC2440 Random
PC2450 Oligo T16
D1020 10×DNA 上樣緩沖液
T1060 50×TAE 緩沖液
通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV)
參考文獻(xiàn):
《Antiallodynic Effect of Hyperbaric Oxygen on Paclitaxel-Induced Peripheral Neuropathy in a Model of Rat and Its Mechanism》 作者:ng Miao, Xianze Meng, Hong He, Xiaojun Ji 期刊:Biomedical & Life Sciences 影響因子:1.917 PMID:
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